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天行健071787

金虫 (小有名气)

[求助] 关于酶切的问题 已有6人参与

求解!!!
最近在构建载体时发现用的内切酶AscI就是切不开,载体上该位点序列是正确的,应该怎么办,着急啊,跪求大家提供建议或办法,非常感谢!
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自立自强,永不言败!
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shx0743

新虫 (正式写手)

除楼上所说的原因之外,你质粒的纯度如何,质粒的质量不好(严重变性)会严重影响酶切效果的!我之前提质粒溶液三有问题,所以每次提的质粒都过度变性,切不开,后来换了溶液三就没问题了,祝你好运!

发自小木虫Android客户端
11楼2016-12-04 21:50:05
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查看全部 15 个回答

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
空载体的话用这一个酶单切都切不开吗?

发自小木虫Android客户端
···
2楼2016-11-18 23:05:17
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天行健071787

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fxpckut215 at 2016-11-19 13:44:07
祝福

4楼2016-11-21 11:35:53
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010308Jing

木虫 (正式写手)

是不是被修饰过的?实在不行就换个酶吧

发自小木虫Android客户端
6楼2016-11-21 15:56:18
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