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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

[求助] 急求!!!有没有人知道不透明的水凝胶怎么做MTT实验? 已有1人参与

审稿意见让补细胞毒性实验,有没有人知道不透明的水凝胶怎么做MTT实验?化学专业面对这种生物问题抓瞎了啊,哭求有没有大神能指点一二,凝胶不透明,做MTT实验最后测吸光度的时候不透光怎么办?细胞贴在凝胶上分不开,没法测细胞存活率……怎么办???求好心人帮忙
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tanchengfang

金虫 (小有名气)

做mtt测量吸光度不要拿着材料去检测,只需要取溶液,你看看原理就懂了。

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学海无涯苦作舟
3楼2016-11-18 09:27:57
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

自己默默顶顶……
2楼2016-11-18 09:20:52
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tanchengfang at 2016-11-18 09:27:57
做mtt测量吸光度不要拿着材料去检测,只需要取溶液,你看看原理就懂了。

不是把培养液吸出来,加MTT显色之后测贴在孔板底部的细胞吗?他们给做的时候都是把上面的吸出来,直接拿96孔板放在酶标仪上测量,你说的取溶液是什么意思,求指教
4楼2016-11-18 13:17:53
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
5楼2016-11-18 13:57:54
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得勝的生命

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用萃取液,直接坐在hydrogel上,用hydrogel压住细胞(或局部细胞)测试,pre-hydrogel dilute solution都可以用,都可以符合iso原則的。就楼主的问题,应该是MTT solution取出来测试是可以的。但是确实需要考虑MTT的原理,比如你的hydrogel中有没有物质会和MTT发生反应。建议楼主查一下ISO 10993-5-2009。另外,MTT的原理网上应该很好找到,可以多了解一下。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2016-11-18 19:09:44
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by basler at 2016-11-18 13:57:54
我觉得你该看看MTT的原理!再做。做MTT不是直接测的,而是溶解后吸出来测!!!你你说的直接测是cck8吧!
...

我明白你的意思了,真是太感谢了,上网查了原理,感觉以前给我们做细胞实验的测试方式都不对了,他们都是直接吸走了培养液加完DMSO拿着底下带细胞的培养板直接去测的,好像知道怎么回事了,感激!
7楼2016-11-18 20:21:59
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 得勝的生命 at 2016-11-18 19:09:44
用萃取液,直接坐在hydrogel上,用hydrogel压住细胞(或局部细胞)测试,pre-hydrogel dilute solution都可以用,都可以符合iso原則的。就楼主的问题,应该是MTT solution取出来测试是可以的。但是确实需要考虑MTT的 ...

恩,查过了,我按照你们给的建议这样找人做一下试试吧,多谢了
8楼2016-11-18 20:23:01
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ljh3797

铁虫 (初入文坛)

如果你的胶中不存在能溶于DMSO中一般就可以使用,如果不行直接用CCK-8。可以在96孔板中加入相同的培养液和10%的测试液孵育一段时间就可以取出同体积的培养液用96孔板测试就行了。

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9楼2016-11-19 15:36:51
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djxustc

铁杆木虫 (正式写手)

CCK_8检测。测试的是细胞代谢产物。

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10楼2016-11-20 01:37:23
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