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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 急求！！！有没有人知道不透明的水凝胶怎么做MTT实验？
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)

[求助] 急求！！！有没有人知道不透明的水凝胶怎么做MTT实验？ 已有1人参与

审稿意见让补细胞毒性实验，有没有人知道不透明的水凝胶怎么做MTT实验？化学专业面对这种生物问题抓瞎了啊，哭求有没有大神能指点一二，凝胶不透明，做MTT实验最后测吸光度的时候不透光怎么办？细胞贴在凝胶上分不开，没法测细胞存活率……怎么办？？？求好心人帮忙
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1楼 2016-11-17 17:30:00
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tanchengfang

金虫 (小有名气)
做mtt测量吸光度不要拿着材料去检测，只需要取溶液，你看看原理就懂了。

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学海无涯苦作舟
3楼2016-11-18 09:27:57
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普通回帖

丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)
自己默默顶顶……
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2楼2016-11-18 09:20:52
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tanchengfang at 2016-11-18 09:27:57
做mtt测量吸光度不要拿着材料去检测，只需要取溶液，你看看原理就懂了。

不是把培养液吸出来，加MTT显色之后测贴在孔板底部的细胞吗？他们给做的时候都是把上面的吸出来，直接拿96孔板放在酶标仪上测量，你说的取溶液是什么意思，求指教
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4楼2016-11-18 13:17:53
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匿名

用户注销 (著名写手)
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5楼2016-11-18 13:57:54
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得勝的生命

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用萃取液，直接坐在hydrogel上，用hydrogel压住细胞（或局部细胞）测试，pre-hydrogel dilute solution都可以用，都可以符合iso原則的。就楼主的问题，应该是MTT solution取出来测试是可以的。但是确实需要考虑MTT的原理，比如你的hydrogel中有没有物质会和MTT发生反应。建议楼主查一下ISO 10993-5-2009。另外，MTT的原理网上应该很好找到，可以多了解一下。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

丫丫小狐仙
6楼2016-11-18 19:09:44
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by basler at 2016-11-18 13:57:54
我觉得你该看看MTT的原理！再做。做MTT不是直接测的，而是溶解后吸出来测！！！你你说的直接测是cck8吧！
...

我明白你的意思了，真是太感谢了，上网查了原理，感觉以前给我们做细胞实验的测试方式都不对了，他们都是直接吸走了培养液加完DMSO拿着底下带细胞的培养板直接去测的，好像知道怎么回事了，感激！
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7楼2016-11-18 20:21:59
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丫丫小狐仙

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 得勝的生命 at 2016-11-18 19:09:44
用萃取液，直接坐在hydrogel上，用hydrogel压住细胞（或局部细胞）测试，pre-hydrogel dilute solution都可以用，都可以符合iso原則的。就楼主的问题，应该是MTT solution取出来测试是可以的。但是确实需要考虑MTT的 ...

恩，查过了，我按照你们给的建议这样找人做一下试试吧，多谢了
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8楼2016-11-18 20:23:01
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ljh3797

铁虫 (初入文坛)
如果你的胶中不存在能溶于DMSO中一般就可以使用，如果不行直接用CCK-8。可以在96孔板中加入相同的培养液和10%的测试液孵育一段时间就可以取出同体积的培养液用96孔板测试就行了。

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9楼2016-11-19 15:36:51
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djxustc

铁杆木虫 (正式写手)
CCK_8检测。测试的是细胞代谢产物。

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10楼2016-11-20 01:37:23
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