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xingwei9830

新虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE凝胶凝固不好啦

我按照分子克隆的配方配了12%的丙烯酰胺凝胶(略有改动:分离胶加了4%的甘油,据说可以减少电内渗),但是浓缩胶和分离胶均凝固不好。尤其是浓缩胶凝固效果更差。然后,我重新配了所有的试剂,也换了新的TEMED,任然凝固不好。放在37度培养箱中也是如此。可是我以前配15%的胶时,凝固效果很好。不知道现在问题出在哪儿,好郁闷啊!请求各位大侠给予解答。
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

我一般配好分离胶后,加一层异丙醇,可以取到消泡、压平胶面的作用,37度20min后有水清洗再倒积层胶。
另外丙烯酰胺和过硫酸铵经常换新的,短期不用放置4度冰箱保存。
TEMED量加大点试试,我用的是千分之一的用量。

[ Last edited by susizheng on 2009-5-22 at 22:45 ]
Thank-you,so-blue.
9楼2009-05-22 22:42:07
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