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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 大肠杆菌感受态细胞的制备实验
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huihey

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌感受态细胞的制备实验 已有1人参与

在制作感受态细胞之前，在培养基中培养大肠杆菌（37度12h）时，用固体培养基还是液体培养基？
还有含:将配好的培养基高压灭菌后冷却至60℃左右,加入Amp储存液,使终浓度为50ug/ml,到底是加多少amp呢？

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1楼 2016-11-09 09:56:12
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ztt2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by huihey at 2016-11-09 09:56:12
在制作感受态细胞之前，在培养基中培养大肠杆菌（37度12h）时，用固体培养基还是液体培养基？
还有含:将配好的培养基高压灭菌后冷却至60℃左右,加入Amp储存液,使终浓度为50ug/ml,到底是加多少amp呢？
...

找本《分子克隆》照着做，或找师兄师姐带着做。

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3楼2016-11-09 10:22:48
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-11-11 23:43:32
1大肠杆菌活化，接固体平板，过夜培养；转接液体过夜培养；再以1:100接种液体，培养至对数中期（OD4.0-6.0），收集制备感受态。
2、氨苄青霉素用无菌水配成50mg/ml的储存液，用除菌滤膜过滤，以1:1000加到培养基中既得50ug/ml。
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生物科学
2楼2016-11-09 10:19:47
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