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A8610587

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量? 已有1人参与

分子量~37KD,带有SUMO标签,37℃3h诱导表达包涵体居多,所以采取低温诱导的方法(22℃。220rpm)。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么?
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小昆虫1

新虫 (初入文坛)

我刚开始诱导的那三个小时忘记摇了,过了三小时才想起来摇,会有影响吗,我是摇床过夜培养的

发自小木虫IOS客户端
5楼2019-08-13 20:49:54
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ztt2015

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by A8610587 at 2016-11-05 16:00:27
分子量~37KD,带有SUMO标签,37℃3h诱导表达包涵体居多,所以采取低温诱导的方法(22℃。220rpm)。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么 ...

低温过夜诱导,纯化一下,看能不能得到目的蛋白。

发自小木虫Android客户端
2楼2016-11-05 21:36:43
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)

蛋白表达没有确定的,要根据你的蛋白性质。你如果重复实验还是这个结果,那就是了。当然,正常情况下,过夜要比3小时表达量多。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-11-06 09:57:44
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ylz2433

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果3h低温诱导的表达量较高,那就3h好了,过夜表达量变低应该是上清蛋白降解或又形成包涵体了
努力,加油!
4楼2016-11-08 14:34:05
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