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蛋白低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
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A8610587
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蛋白低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
已有1人参与
分子量~37KD,带有SUMO标签,37℃3h诱导表达包涵体居多,所以采取低温诱导的方法(22℃。220rpm)。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么?
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2016-11-05 16:00:27
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ztt2015
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1楼
:
Originally posted by
A8610587
at 2016-11-05 16:00:27
分子量~37KD,带有SUMO标签,37℃3h诱导表达包涵体居多,所以采取低温诱导的方法(22℃。220rpm)。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么?怎么提高表达量?
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么 ...
低温过夜诱导,纯化一下,看能不能得到目的蛋白。
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2楼
2016-11-05 21:36:43
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yuzaiyutian
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蛋白表达没有确定的,要根据你的蛋白性质。你如果重复实验还是这个结果,那就是了。当然,正常情况下,过夜要比3小时表达量多。
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3楼
2016-11-06 09:57:44
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ylz2433
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
如果3h低温诱导的表达量较高,那就3h好了,过夜表达量变低应该是上清蛋白降解或又形成包涵体了
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努力,加油!
4楼
2016-11-08 14:34:05
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我刚开始诱导的那三个小时忘记摇了,过了三小时才想起来摇,会有影响吗,我是摇床过夜培养的
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5楼
2019-08-13 20:49:54
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