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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么？怎么提高表达量？
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A8610587

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么？怎么提高表达量？ 已有1人参与

分子量~37KD，带有SUMO标签，37℃3h诱导表达包涵体居多，所以采取低温诱导的方法（22℃。220rpm）。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么？怎么提高表达量？
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么？
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1楼 2016-11-05 16:00:27
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ylz2433

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果3h低温诱导的表达量较高，那就3h好了，过夜表达量变低应该是上清蛋白降解或又形成包涵体了
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努力，加油！
4楼2016-11-08 14:34:05
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ztt2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by A8610587 at 2016-11-05 16:00:27
分子量~37KD，带有SUMO标签，37℃3h诱导表达包涵体居多，所以采取低温诱导的方法（22℃。220rpm）。
但是低温过夜比3h低温诱导的表达量要低是正常的么？怎么提高表达量？
我有必要做个3、4、5、6h的低温诱导梯度么 ...

低温过夜诱导，纯化一下，看能不能得到目的蛋白。

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2楼2016-11-05 21:36:43
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)
蛋白表达没有确定的，要根据你的蛋白性质。你如果重复实验还是这个结果，那就是了。当然，正常情况下，过夜要比3小时表达量多。

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3楼2016-11-06 09:57:44
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小昆虫1

新虫 (初入文坛)
我刚开始诱导的那三个小时忘记摇了，过了三小时才想起来摇，会有影响吗，我是摇床过夜培养的

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5楼2019-08-13 20:49:54
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