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gdm_1988

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌BL21高密度发酵表达小分子蛋白表达量低

各位虫友好:最近在做大肠杆菌高密度发酵表达小分子蛋白(蛋白大小6-7KD),表达蛋白为包涵体,表达量低,诱导前菌体生长较好,诱导6-9h后,湿重和OD不变,SDS-PAGE蛋白纯度下降,质粒稳定性也明显下降,蛋白纯度只有20%左右,但是摇瓶表达一般能达到40% ,不知道大家有没有遇到这种情况?还请高手指教
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by gdm_1988 at 2016-11-06 19:49:47
可是罐子一般会比摇瓶溶氧更好啊,我罐子控在30以上...

我记得养酵母的时候需要溶氧比较高,细菌用那么高的溶氧吗?这个我不太清楚,你可以查一查文献。我们实验室之前做的也是,小瓶比罐稳定,罐子就是特别麻烦,需要摸索发酵条件,摸索好了条件就可以发一篇文章了。而且还要注意,你的罐子的传感器是否准确,有没有校准过。

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-11-06 20:01:03
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star013

新虫 (知名作家)


2楼2016-11-03 14:44:29
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

3楼2016-11-05 21:14:35
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gdm_1988

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-05 21:14:35
给的建议是注意溶氧

可是罐子一般会比摇瓶溶氧更好啊,我罐子控在30以上
4楼2016-11-06 14:50:32
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