| 查看: 2124 | 回复: 8 | |||
[求助]
大肠杆菌BL21高密度发酵表达小分子蛋白表达量低
|
各位虫友好:最近在做大肠杆菌高密度发酵表达小分子蛋白（蛋白大小6-7KD），表达蛋白为包涵体，表达量低，诱导前菌体生长较好，诱导6-9h后，湿重和ＯＤ不变，SDS-PAGE蛋白纯度下降，质粒稳定性也明显下降，蛋白纯度只有20%左右，但是摇瓶表达一般能达到40% ，不知道大家有没有遇到这种情况？还请高手指教 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 高密度发酵 |
» 猜你喜欢
可靠消息，8月21号(明天)放榜
已经有3人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有20人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有125人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有15人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有16人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有13人回复
-
为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？
已经有5人回复
-
今天放榜没戏了吧
已经有5人回复
-
今天放榜吗？
已经有15人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有12人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
star013 
新虫 (知名作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 散金: 831
- 红花: 33
- 帖子: 5395
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 1401381
- 注册: 2011-09-14
- 专业: 法学
2楼2016-11-03 14:44:29
田生帅菜
新虫 (正式写手)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1765.1
- 散金: 369
- 红花: 11
- 帖子: 390
- 在线: 55.2小时
- 虫号: 5199485
- 注册: 2016-11-04
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2016-11-05 21:14:35
4楼2016-11-06 14:50:32
5楼2016-11-06 19:49:47
田生帅菜
新虫 (正式写手)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1765.1
- 散金: 369
- 红花: 11
- 帖子: 390
- 在线: 55.2小时
- 虫号: 5199485
- 注册: 2016-11-04
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
|
我记得养酵母的时候需要溶氧比较高，细菌用那么高的溶氧吗？这个我不太清楚，你可以查一查文献。我们实验室之前做的也是，小瓶比罐稳定，罐子就是特别麻烦，需要摸索发酵条件，摸索好了条件就可以发一篇文章了。而且还要注意，你的罐子的传感器是否准确，有没有校准过。 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2016-11-06 20:01:03
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11638.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3407
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
你的DO控制没有问题。营养分配:留一半营养到诱导后补料。诱导点设置:如果你的培养基能支持长到OD达到80，你就20左在开始诱导。诱导剂用量:诱导剂用量要适量高一些，比如高于0.5mM。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-11-06 20:30:52
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11638.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3407
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2016-11-06 20:36:18
9楼2016-11-12 14:58:25
