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大肠杆菌BL21高密度发酵表达小分子蛋白表达量低
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各位虫友好:最近在做大肠杆菌高密度发酵表达小分子蛋白（蛋白大小6-7KD），表达蛋白为包涵体，表达量低，诱导前菌体生长较好，诱导6-9h后，湿重和ＯＤ不变，SDS-PAGE蛋白纯度下降，质粒稳定性也明显下降，蛋白纯度只有20%左右，但是摇瓶表达一般能达到40% ，不知道大家有没有遇到这种情况？还请高手指教 |
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star013 
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2楼2016-11-03 14:44:29
田生帅菜
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3楼2016-11-05 21:14:35
4楼2016-11-06 14:50:32
5楼2016-11-06 19:49:47
田生帅菜
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我记得养酵母的时候需要溶氧比较高，细菌用那么高的溶氧吗？这个我不太清楚，你可以查一查文献。我们实验室之前做的也是，小瓶比罐稳定，罐子就是特别麻烦，需要摸索发酵条件，摸索好了条件就可以发一篇文章了。而且还要注意，你的罐子的传感器是否准确，有没有校准过。 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2016-11-06 20:01:03
ganchao1776
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你的DO控制没有问题。营养分配:留一半营养到诱导后补料。诱导点设置:如果你的培养基能支持长到OD达到80，你就20左在开始诱导。诱导剂用量:诱导剂用量要适量高一些，比如高于0.5mM。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-11-06 20:30:52
ganchao1776
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8楼2016-11-06 20:36:18
9楼2016-11-12 14:58:25
