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酶活
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本人最近在做一种植物对胰淀粉酶活性的抑制作用,做了6、7次,都没做出来,变化趋势没有规律,没有办法分析数据。实验过程使用的是移液管量取,温度控制40度。但是不知道还有哪些因素影响很大。方法如下: 分别准确吸取1 mL1%淀粉溶液、0.5 mL磷酸盐缓冲溶液、0.1 mL 1.2%的 NaCl溶液于25 mL容量瓶中,在40 ℃恒温水浴锅中预热10 min,精密量取胰酶溶液0.5 mL,然后分别精密量取不同浓度未发酵茶提取液2 mL,作为各个实验组;再次在40℃恒温水浴锅中保温10 min,冷却至室温后,加入2 mL3,5-二硝基水杨酸溶液,在沸水浴中煮沸5 min,迅速冷却后定容至刻度。在波长为570 nm处测定吸光值并计算胰酶中原有的淀粉酶活力;计算各个实验组反应后胰酶中的淀粉酶的活力。每个处理重复3次。 同法做空白对照实验,只加入不同浓度未发酵栘依提取液2 ml,用缓冲液代替胰酶溶液,每个处理重复3次。 淀粉酶活力按下式计算。 淀粉酶活力(mg/min•g)= M/(C×V×T) 式中:M—查标准曲线求得的淀粉酶水解淀粉所生成的麦芽糖质量,mg; C—所加胰酶溶液浓度,g/mL; V—所加胰酶溶液的体积,mL; T—酶作用反应时间,min。 求大神指导啊!!! |
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