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酶活
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本人最近在做一种植物对胰淀粉酶活性的抑制作用，做了6、7次，都没做出来，变化趋势没有规律，没有办法分析数据。实验过程使用的是移液管量取，温度控制40度。但是不知道还有哪些因素影响很大。方法如下： 分别准确吸取1 mL1％淀粉溶液、0.5 mL磷酸盐缓冲溶液、0.1 mL 1.2%的 NaCl溶液于25 mL容量瓶中，在40 ℃恒温水浴锅中预热10 min，精密量取胰酶溶液0.5 mL，然后分别精密量取不同浓度未发酵茶提取液2 mL，作为各个实验组；再次在40℃恒温水浴锅中保温10 min，冷却至室温后，加入2 mL3,5-二硝基水杨酸溶液，在沸水浴中煮沸5 min，迅速冷却后定容至刻度。在波长为570 nm处测定吸光值并计算胰酶中原有的淀粉酶活力；计算各个实验组反应后胰酶中的淀粉酶的活力。每个处理重复3次。 同法做空白对照实验，只加入不同浓度未发酵栘依提取液2 ml，用缓冲液代替胰酶溶液，每个处理重复3次。 淀粉酶活力按下式计算。 淀粉酶活力（mg/min•g）= M/(C×V×T) 式中：M—查标准曲线求得的淀粉酶水解淀粉所生成的麦芽糖质量，mg； C—所加胰酶溶液浓度，g/mL； V—所加胰酶溶液的体积，mL； T—酶作用反应时间，min。 求大神指导啊！！！ |
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