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小疙瘩

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 有机合成

[求助] 发酵染菌求助各路大神已有7人参与

最近发酵罐（10t）老是染菌，稀薄培养基空培通过，发酵培养移种后5~17h染菌，长杆短杆均有。
采取的措施：
1.空气过滤器空消
2.罐体空消，碱煮，甲醛熏蒸均做过
3.下罐检查无漏点，罐体密封性检查无漏点
4.实消延长时间、提高压力均无效
5.移种管道消毒0.2MPa，1h以上
求大神指点~~~整天搞的头痛啊

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大肠杆菌工程菌发酵

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1楼 2016-10-30 21:57:06

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bio_weiyaya

金虫 (正式写手)

应助: 19 (小学生)
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专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

有正常批次吗？5-17h染菌时杂菌量如何。
空配通过，应该可以把设备及空气原因排除，空培与发酵之间差异有（1）培养基成分变化（2）移种操作（3）取样、补料（4）种子液
解决方法：
（1）温水配料，非溶解性物料过筛，灭菌时适当提高搅拌转速，过滤器如果是反消则每批次后检查过滤器状态。
（2）移种管道灭菌时监测压力、温度，延长灭菌时间。
（3）设备取样阀、补料阀、移种阀门通蒸汽进管内消毒。
（4）尽量减少前期取样，若取样确保蒸汽质量及灭菌时间。
（5）种子液做好无菌检查，确定无菌再移种。