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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 发酵染菌求助各路大神
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小疙瘩

金虫 (小有名气)

[求助] 发酵染菌求助各路大神 已有7人参与

最近发酵罐（10t）老是染菌，稀薄培养基空培通过，发酵培养移种后5~17h染菌，长杆短杆均有。
采取的措施：
1.空气过滤器空消
2.罐体空消，碱煮，甲醛熏蒸均做过
3.下罐检查无漏点，罐体密封性检查无漏点
4.实消延长时间、提高压力均无效
5.移种管道消毒0.2MPa，1h以上
求大神指点~~~整天搞的头痛啊
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1楼 2016-10-30 21:57:06
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sgy005

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
种子检验过没有？种子罐有没有检验过？确定提供的种子无问题，
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2楼2016-10-31 15:54:28
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普通回帖

sunnysen

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2016-10-31 17:32:59
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小疙瘩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sgy005 at 2016-10-31 15:54:28
种子检验过没有？种子罐有没有检验过？确定提供的种子无问题，

种子摇瓶培养没问题
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4楼2016-10-31 19:12:37
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bio_weiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有正常批次吗？5-17h染菌时杂菌量如何。
空配通过，应该可以把设备及空气原因排除，空培与发酵之间差异有（1）培养基成分变化（2）移种操作（3）取样、补料（4）种子液
解决方法：
（1）温水配料，非溶解性物料过筛，灭菌时适当提高搅拌转速，过滤器如果是反消则每批次后检查过滤器状态。
（2）移种管道灭菌时监测压力、温度，延长灭菌时间。
（3）设备取样阀、补料阀、移种阀门通蒸汽进管内消毒。
（4）尽量减少前期取样，若取样确保蒸汽质量及灭菌时间。
（5）种子液做好无菌检查，确定无菌再移种。
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爱知，求真
5楼2016-11-01 11:11:11
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得发酵条件稍有不慎的话不至于每次都染菌，问题极有可能出在种子培养阶段，有可能是种子不纯，有可能是接种时染菌
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···
6楼2016-11-01 16:13:43
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jianbg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、对种子无菌做考察，确认种子是否带菌
2、检查接种管道密封性，灭菌操作、接种操作是否有问题
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7楼2016-11-02 11:21:47
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gnice

金虫 (正式写手)
培养基有不溶成分吗？

发自小木虫Android客户端
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8楼2016-11-03 07:48:55
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stone_f

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

考虑下排气管。正式发酵的时候装液量是否比试车的装得多？发酵液是否泡沫很多？如果泡沫顶罐严重，或者装液量过高，或者搅拌转速、通气量过大，导致培养基有可能接触到排气管，那有可能是从排气管那边染菌了。因为你染的菌也很杂，应该是从环境中染上的
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9楼2016-11-03 22:03:16
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hai6zhang

铜虫 (初入文坛)
现在如何了？问题解决了吗？
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10楼2016-11-21 16:02:51
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