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小疙瘩

金虫 (小有名气)

[求助] 发酵染菌求助各路大神 已有7人参与

最近发酵罐(10t)老是染菌,稀薄培养基空培通过,发酵培养移种后5~17h染菌,长杆短杆均有。
采取的措施:
1.空气过滤器空消
2.罐体空消,碱煮,甲醛熏蒸均做过
3.下罐检查无漏点,罐体密封性检查无漏点
4.实消延长时间、提高压力均无效
5.移种管道消毒0.2MPa,1h以上
求大神指点~~~整天搞的头痛啊
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sgy005

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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种子检验过没有?种子罐有没有检验过?确定提供的种子无问题,
2楼2016-10-31 15:54:28
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普通回帖

sunnysen

禁虫 (小有名气)

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3楼2016-10-31 17:32:59
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小疙瘩

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sgy005 at 2016-10-31 15:54:28
种子检验过没有?种子罐有没有检验过?确定提供的种子无问题,

种子摇瓶培养没问题
4楼2016-10-31 19:12:37
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bio_weiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有正常批次吗?5-17h染菌时杂菌量如何。
空配通过,应该可以把设备及空气原因排除,空培与发酵之间差异有(1)培养基成分变化(2)移种操作(3)取样、补料(4)种子液
解决方法:
(1)温水配料,非溶解性物料过筛,灭菌时适当提高搅拌转速,过滤器如果是反消则每批次后检查过滤器状态。
(2)移种管道灭菌时监测压力、温度,延长灭菌时间。
(3)设备取样阀、补料阀、移种阀门通蒸汽进管内消毒。
(4)尽量减少前期取样,若取样确保蒸汽质量及灭菌时间。
(5)种子液做好无菌检查,确定无菌再移种。
爱知,求真
5楼2016-11-01 11:11:11
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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我觉得发酵条件稍有不慎的话不至于每次都染菌,问题极有可能出在种子培养阶段,有可能是种子不纯,有可能是接种时染菌
···
6楼2016-11-01 16:13:43
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jianbg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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1、对种子无菌做考察,确认种子是否带菌
2、检查接种管道密封性,灭菌操作、接种操作是否有问题
7楼2016-11-02 11:21:47
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gnice

金虫 (正式写手)

8楼2016-11-03 07:48:55
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stone_f

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

考虑下排气管。正式发酵的时候装液量是否比试车的装得多?发酵液是否泡沫很多?如果泡沫顶罐严重,或者装液量过高,或者搅拌转速、通气量过大,导致培养基有可能接触到排气管,那有可能是从排气管那边染菌了。因为你染的菌也很杂,应该是从环境中染上的
9楼2016-11-03 22:03:16
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hai6zhang

铜虫 (初入文坛)

现在如何了?问题解决了吗?
10楼2016-11-21 16:02:51
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