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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白纯化求助
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
变性直接上柱子

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I am not a hero , but I served with heroes！
21楼2016-11-21 20:55:51
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furongzhen

新虫 (小有名气)
蛋白不友好，难办哦，换宿主，载体试试，或共表达促溶的伴侣蛋白

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22楼2016-11-21 21:24:22
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nadia926499

木虫 (小有名气)
标签在哪端啊，换另一端试试？

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23楼2016-11-21 22:35:23
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云

【答案】应助回帖

个人理解，不是His标签蛋白的纯化，不需要变性复性的么？
难不成是表达了，不是你需要的？
GST变性复性，挂柱子，70 KDa附近，没问题；
GST包涵体，70 KDa通过改变诱导表达条件，部分可溶表达，但是可溶性部分，挂柱子能力较弱……
你这个，不理解……
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锤之千古
24楼2016-11-22 11:01:22
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存世孤品

新虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by nadia926499 at 2016-11-21 22:35:23
标签在哪端啊，换另一端试试？

两端都试过了

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25楼2016-11-23 00:04:41
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存世孤品

新虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by cory0931 at 2016-11-22 11:01:22
个人理解，不是His标签蛋白的纯化，不需要变性复性的么？
难不成是表达了，不是你需要的？
GST变性复性，挂柱子，70 KDa附近，没问题；
GST包涵体，70 KDa通过改变诱导表达条件，部分可溶表达，但是可溶性部分， ...

我也不理解……

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26楼2016-11-23 00:05:35
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存世孤品

新虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by wlt728 at 2016-11-21 20:55:51
变性直接上柱子

一直这么干，就是挂不上

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27楼2016-11-23 00:06:02
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存世孤品

新虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by furongzhen at 2016-11-21 21:24:22
蛋白不友好，难办哦，换宿主，载体试试，或共表达促溶的伴侣蛋白

换了好多个了……

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28楼2016-11-23 00:06:23
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存世孤品

新虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 天际雾影 at 2016-11-21 19:58:37
你试试将UREA浓度稀释到4M或者更低时能不能挂上，我的在8M时柱上挂的也不多。尿素可能会影响结合。...

真的么

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29楼2016-11-23 00:07:54
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