24小时热门版块排行榜    

查看: 1178  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

luckydog52

木虫 (著名写手)

[交流] 对PCR产物测序需要怎么准备样品?请大家教教经验,谢谢

我做完PCR扩出了目的片段,大小也合适。想对这个测一下序列。
据说好像是要插入到质粒里,把质粒一起拿去测序。

请问应该怎么做?

插入质粒之后,都应该给测序公司提供些什么?

为什么要插入到质粒里?

非常感谢!!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-2 at 12:12 ]
回复此楼
自信源于一次次成功的积累
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijx83

金虫 (小有名气)

我们实验室就是直接送pcr产物去测序,没问题的
4楼2008-12-02 19:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

shining-rose

金虫 (小有名气)

★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-17 10:09
把目的片段连接到T载体上,然后转化到感受态细胞中培养,鉴定阳性菌落,培养转化好菌落,将提取质粒再做一下鉴定(酶切或PCR)。把阳性的质粒或菌液寄给测序公司就ok了。

有什么不足请楼下多多指点。
2楼2008-11-28 14:41:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhyyk10

金虫 (小有名气)

一般PCR产物在48h之后就降解了,为了安全起见,都是要导入质粒中,送阳性克隆或菌液的
相信自己!
3楼2008-12-02 10:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckydog52

木虫 (著名写手)

谢谢各位!!!
自信源于一次次成功的积累
5楼2008-12-03 11:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 00:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 8/400 2026-08-22 23:51 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见