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基因达人

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因克隆

请教各位虫友大神们:最近在做基因克隆，T载体连接基因后转化到DH5α，在AMP的LB培养基上有明显的蓝白斑，然后将阳性菌重新接种到了AMP的LB新鲜培养基，生长正常，进行了菌落PCR和摇菌提质粒，随后又进行了质粒PCR。现在问题来了:菌落PCR没有目标带，提取质粒进行PCR出现了多条非特异性带，其中夹杂着目标带，检测质粒浓度在50ng左右，但是质粒电泳又完全没有条带，这到底是什么地方有问题？

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1楼 2016-10-26 07:45:19
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基因达人

新虫 (初入文坛)
经验丰富的虫友们快来说两句吧

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2楼2016-10-26 09:13:31
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彭江容

新虫 (小有名气)
质粒做酶切了吗？

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3楼2016-11-07 20:33:40
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大头妞妞

新虫 (小有名气)
我最近也在做呢，你做出来了吗

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4楼2016-11-16 10:53:07
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