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基因克隆
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请教各位虫友大神们:最近在做基因克隆,T载体连接基因后转化到DH5α,在AMP的LB培养基上有明显的蓝白斑,然后将阳性菌重新接种到了AMP的LB新鲜培养基,生长正常,进行了菌落PCR和摇菌提质粒,随后又进行了质粒PCR。现在问题来了:菌落PCR没有目标带,提取质粒进行PCR出现了多条非特异性带,其中夹杂着目标带,检测质粒浓度在50ng左右,但是质粒电泳又完全没有条带,这到底是什么地方有问题? 发自小木虫Android客户端 |
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