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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 可以在多克隆位点以外的地方插入外源基因吗？
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18716248350

新虫 (小有名气)

[求助] 可以在多克隆位点以外的地方插入外源基因吗？ 已有2人参与

可以在非多克隆位点的地方插入外源基因吗？谢谢
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1楼 2016-10-25 11:02:45
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小灯泡

金虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-26 08:11:33
请问你如何实施非多克隆位点处的外源基因插入？
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新的旅程新的开始
2楼2016-10-25 11:11:57
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18716248350

新虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-26 08:11:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小灯泡 at 2016-10-25 11:11:57
请问你如何实施非多克隆位点处的外源基因插入？

载体非多克隆位点也有酶切位点啊
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3楼2016-10-25 15:36:34
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willzhuu

铁虫 (著名写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-26 08:11:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18716248350 at 2016-10-25 15:36:34
载体非多克隆位点也有酶切位点啊...

可以，但注意不要破坏骨架结构原件，如启动子增强子polyA等序列

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不求一鸣惊人，但求抛砖引玉。
4楼2016-10-26 08:01:24
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可疑的，只要保留抗性筛选标记和复制子就可以
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···
5楼2016-10-27 08:54:10
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18716248350

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小冀- at 2016-10-27 08:54:10
可疑的，只要保留抗性筛选标记和复制子就可以

哦哦，好的，谢谢
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6楼2016-10-27 11:02:01
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18716248350

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by willzhuu at 2016-10-26 08:01:24
可以，但注意不要破坏骨架结构原件，如启动子增强子polyA等序列
...

嗯嗯，谢谢
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7楼2016-10-27 11:02:19
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月夜听雨0323

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用同源重组的方法啊！载体线性化方法可以用PCR的方式，就不用考虑酶切位点，可以用诺唯赞的C112单克隆片段，3.5h就可以转化出来了，很方便
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8楼2016-10-27 16:04:40
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luckydog52

木虫 (著名写手)
你需要一个pcr仪，一株大肠杆菌。很容易做到。

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自信源于一次次成功的积累
9楼2016-10-27 17:53:14
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国产武器

铜虫 (小有名气)
看你的目的呀！保证必要原件的存在，就没问题！启动子，终子子

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10楼2016-10-29 08:08:12
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