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千乐

银虫 (正式写手)

[求助] 请问为什么消化细胞用胰酶? 已有1人参与

如题,请问为什么消化细胞用胰酶而不用别的酶?

胰酶是怎么来的呢?克隆培养吗?还是从动物体内提取?

消化细胞的胰酶为什么用0.25%的?这是经验得出来的适合浓度吗?那么原本的纯胰酶是用什么溶液稀释成0.25呢?

亲们的胰酶,加EDTA吗?为什么呢?

谢谢

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欲将心事付瑶琴,知音少,弦断有谁听
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davidwuran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
千乐: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2017-02-23 00:26:50
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的,所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值,浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的,这个是分散细胞用的,使消化细胞维持分离状态,不至于都黏连在一起。
2楼2016-10-24 14:17:17
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千乐

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的,所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值,浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的,这个是分散细胞用的,使消化细胞维持分离状 ...

EDTA为什么能分散细胞呢?这是什么原理呀?

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欲将心事付瑶琴,知音少,弦断有谁听
3楼2016-10-24 14:40:58
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无知的小强

木虫 (正式写手)

我觉着,EDTA是络合金属离子的,这样的话,一些对细胞培养不利的酶就没有了活性,维持细胞的活性

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Behind the mask is an idea, and ideas are bulletproof.
4楼2016-10-24 14:54:24
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davidwuran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 千乐 at 2016-10-24 14:40:58
EDTA为什么能分散细胞呢?这是什么原理呀?
...

EDTA是金属螯合剂,能够螯合钙离子,而钙离子是钙粘合素(cadherin)所必须的。没有钙离子,细胞就不会黏合
5楼2016-10-24 14:58:22
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wugenpeng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的,所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值,浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的,这个是分散细胞用的,使消化细胞维持分离状 ...

胰酶对的,但是EDTA不是那样。有的细胞好消化,直接胰酶,不用EDTA,但是有的细胞难消化,要用含有EDTA的胰酶,另外,生产上有一种方法,直接用EDTA消化细胞。EDTA是金属螯合剂,细胞贴壁粘附好像需要钙离子,
6楼2016-10-25 11:31:27
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在长在的man

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的,所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值,浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的,这个是分散细胞用的,使消化细胞维持分离状 ...

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7楼2016-10-26 10:22:49
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木木三ping

新虫 (小有名气)

我们一般用0.05%,0.25太猛了

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8楼2019-06-13 21:35:52
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