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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 请问为什么消化细胞用胰酶？
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千乐

银虫 (正式写手)

[求助] 请问为什么消化细胞用胰酶？ 已有1人参与

如题，请问为什么消化细胞用胰酶而不用别的酶？

胰酶是怎么来的呢？克隆培养吗？还是从动物体内提取？

消化细胞的胰酶为什么用0.25%的？这是经验得出来的适合浓度吗？那么原本的纯胰酶是用什么溶液稀释成0.25呢？

亲们的胰酶，加EDTA吗？为什么呢？

谢谢

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欲将心事付瑶琴，知音少，弦断有谁听
1楼 2016-10-23 14:31:00
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davidwuran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
千乐: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2017-02-23 00:26:50
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的，所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值，浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的，这个是分散细胞用的，使消化细胞维持分离状态，不至于都黏连在一起。
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2楼2016-10-24 14:17:17
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千乐

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的，所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值，浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的，这个是分散细胞用的，使消化细胞维持分离状 ...

EDTA为什么能分散细胞呢？这是什么原理呀？

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欲将心事付瑶琴，知音少，弦断有谁听
3楼2016-10-24 14:40:58
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无知的小强

木虫 (正式写手)
我觉着，EDTA是络合金属离子的，这样的话，一些对细胞培养不利的酶就没有了活性，维持细胞的活性

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Behind the mask is an idea, and ideas are bulletproof.
4楼2016-10-24 14:54:24
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davidwuran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 千乐 at 2016-10-24 14:40:58
EDTA为什么能分散细胞呢？这是什么原理呀？
...

EDTA是金属螯合剂，能够螯合钙离子，而钙离子是钙粘合素（cadherin）所必须的。没有钙离子，细胞就不会黏合
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5楼2016-10-24 14:58:22
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wugenpeng

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的，所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值，浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的，这个是分散细胞用的，使消化细胞维持分离状 ...

胰酶对的，但是EDTA不是那样。有的细胞好消化，直接胰酶，不用EDTA，但是有的细胞难消化，要用含有EDTA的胰酶，另外，生产上有一种方法，直接用EDTA消化细胞。EDTA是金属螯合剂，细胞贴壁粘附好像需要钙离子，
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6楼2016-10-25 11:31:27
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在长在的man

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by davidwuran at 2016-10-24 14:17:17
胰蛋白酶是消化黏附蛋白的，所以能把贴壁细胞消化下来。一般的胰蛋白酶是用基因工程方法在大肠杆菌中合成的。消化的胰酶浓度是经验值，浓度过高会损害细胞的。EDTA要加的，这个是分散细胞用的，使消化细胞维持分离状 ...

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7楼2016-10-26 10:22:49
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木木三ping

新虫 (小有名气)
我们一般用0.05%，0.25太猛了

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8楼2019-06-13 21:35:52
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