24小时热门版块排行榜    

查看: 1033  |  回复: 0

鑫风之记忆

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助】哪位大侠做过原代细胞提取,用percoll分离的?小弟不得技术要领啊!急求帮助啊

最近在提取雏鸭的原代肝细胞,用的体内灌流法,先用肝素钠冲血,再用胶原酶IV消化,然后取下肝脏,剪碎,加培养基,500rpm离心,3min。离两次后,再用percoll分离。查的方法是:1、percoll原液1.131的,然后0.1MPBS 1:9稀释成分离液I,2、再与0.01M PBS以7:3配比,4000rpm先离心,得分离液II 3、缓慢加入细胞悬液,4000rpm分离3min。不知为啥,我做的总是不分层,总是集中在培养基和percoll之间,显微镜下就是图上这种,有细胞,但好多杂质。
请问大神,这些杂质是什么东西啊?细胞碎片吗?
还有我的PBS是自己配的,也是一些通用的配方,感觉没什么问题。
有做过percoll分离细胞的大神,告知一下percoll分离细胞的要点啊。我查的是分离液II配好后要先离心,再加细胞离心,这样合理吗?我也试过直接离心细胞,还是不行呢。
感激不尽感激不尽!!

求助】哪位大侠做过原代细胞提取,用percoll分离的?小弟不得技术要领啊!急求帮助啊
无percoll-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

风雨兼程,有你,就有希望
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 鑫风之记忆 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭! 2026-03-15 12/600 2026-03-16 21:59 by 大米饭!
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分,求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
信息提示
请填处理意见