应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切的目的基因与质粒连接无阳性菌怎么解决？
52/1返回列表
查看: 2784  |  回复: 42
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

鸢尾很辣

木虫 (正式写手)

[求助] 双酶切的目的基因与质粒连接无阳性菌怎么解决？ 已有4人参与

本人目的片段1200bp左右，PCR后胶回收产物&载体用Kpn I和Xba I双酶切37℃过夜，目的片段：载体比例10:1，16℃连接过夜，转化后一直没有长出阳性菌，请大家帮帮忙，看我哪里出现了问题。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-10-20 19:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鸢尾很辣

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 小冀- at 2016-10-21 16:18:42
可能没连上，酶切回收片段浓度高吗，pcr有没有杂带啥的？

酶切片段没有测浓度，但是条带特别亮，也没有杂带。因为担心没有连上所以都是连接过夜的，不知道行不行，连接酶也是换的新的
赞一下 回复此楼
16楼2016-10-21 16:50:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 43 个回答

lemonvivi

新虫 (小有名气)
是不是都没有连接闪上，能把你链接加的具体东西说一下吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-20 20:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lemonvivi

新虫 (小有名气)
片段与载体比例要以摩尔比而不是体积比哈

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-10-20 20:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鸢尾很辣

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lemonvivi at 2016-10-20 20:48:11
片段与载体比例要以摩尔比而不是体积比哈

是浓度比的意思吗？我是否应该去测一个浓度，什么摩尔比比较恰当。
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-20 21:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 43 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭