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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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caiqingchong

木虫 (著名写手)

[交流] 请问:如何进行双基因共表达?

目前已经在一个表达载体克隆了一个基因,并实现了表达,想再放进去一个基因,并实现共表达。

现在我手头的载体就有一个mcs,如果把两个基因都放在这个mcs,那么我后面那段基因是不是要重新加一个启动子?

如果用同一个启动子的话,那么前面那个基因是否要去掉终止子?后面的基因ATG前是否必须加一个rbs序列?
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veronica5129

铜虫 (初入文坛)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-15 11:01
一般来说可以实现融合表达,即一个启动子驱动2个基因实现单顺反子表达,要求:第一个基因去掉stop codon ,then make sure the second gene is in-frame with the first one.
    试问一下你所指的rbs序列具体指的哪个元件?实验材料是?
性格决定命运
4楼2008-11-26 17:59:21
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

分别克隆然后混起来转染不行?
2楼2008-11-26 17:20:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

要不然这样,可以参考promega的psiCHECK这个载体
上面有两个荧光素酶基因共表达
看看人家怎么做的~~
3楼2008-11-26 17:21:41
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wangjiasi

木虫 (正式写手)

两种蛋白构建到同种载体,或构建到两种有兼容性的载体上,然后两个蛋白的载体共转染
5楼2008-11-26 18:11:01
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