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huafaqiufeng

木虫 (小有名气)

[求助] 多肽免疫小鼠制备多克隆抗体 已有1人参与

各位大神,有多肽免疫小鼠制备多克隆抗体经验的吗?
有问题请教如下:
1.多肽初次免疫小鼠的剂量
2.再次免疫剂量是否改变
3.一般需免疫多少次最终收血清
先谢谢各位大神!

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程文282

捐助贵宾 (小有名气)


这个不是很清楚,一般都是免疫兔子的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-10-18 09:37:19
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

我的经验仅供参考1,初次免疫100微克,加免50微克免疫三次测效价,第四次加免7天眼眶采血,1.5毫升左右

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

云山苍苍,江水泱泱,先生之风,山高水长
3楼2016-10-18 10:14:25
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huafaqiufeng

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 程文282 at 2016-10-18 09:37:19
这个不是很清楚,一般都是免疫兔子的

谢谢

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4楼2016-10-19 23:48:49
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huafaqiufeng

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 159236478 at 2016-10-18 10:14:25
我的经验仅供参考1,初次免疫100微克,加免50微克免疫三次测效价,第四次加免7天眼眶采血,1.5毫升左右

感谢,可惜不是应助贴,不能发金币,
请问大神,收集血清后需要添加硫酸汞或者叠氮钠吗?如果添加了,对之后的ELASA有影响吗?
还有现在在做抗原,比较苦恼蛋白纯化后的保存问题,希望缓冲液细胞毒性越小越好,请问大神,蛋白能够直接于1×PBS内-80度保存吗?还有其他毒性较小的缓冲液吗?
谢谢,如回复的话,别忘了发应助贴~

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5楼2016-10-20 00:10:06
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star013

新虫 (知名作家)


6楼2016-10-20 13:15:28
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

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huafaqiufeng: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 非常感谢! 2016-10-20 17:55:04
血清短期应用不需要添加防腐剂,每个离心管200微生,多分几个管,常用的1管放4度,剩下的-20度保存
用PBS就可以,我们也做抗原,最后的透析液就是PBS,我们免疫老鼠问题不大!
生理盐水是和血液等渗的液体,ph中性,你要是担心PBS的话,可用生理盐水试试!
祝好!
云山苍苍,江水泱泱,先生之风,山高水长
7楼2016-10-20 15:50:24
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