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基因构建到表达载体上一直检测不到过表达 已有4人参与
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| 今年上半年购买了一个基因的克隆载体，然后交给外包公司，让他们把CDS序列连接到表达载体上面，目的基因N端加了一小段柔性肽和HA标签，后面通过包装慢病毒感染细胞，一直不能检测到HA，换了蛋白本身的的抗体也检测不到蛋白，细胞内和细胞外都没有，想请问一下这个过表达体系是不是哪里缺少东西出了问题？ 之后老师建议把克隆载体直接转染到细胞当中，这样能表达蛋白么，还是应该把构建好的表达载体转染到细胞当中？ |
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肖颖2009
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3楼2016-10-09 10:28:19
4楼2016-10-09 12:53:44
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