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基因敲除后的互补实验
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实验室师兄已经利用同源重组的方式通过PEG介导的原生质体转化方法成功将一个基因敲掉了，并且通过了PCR及southern验证是正确，现在我需要接着做互补，我看文献正在构建了互补载体，但我对后面的实验有所困惑，我要是互补载体构建好了，然后我用敲掉的基因的转化子做原生质体，之后我是直接把互补载体导入原生质体吗？还是要将互补载体酶切或者什么的？原理是什么呢？希望懂得的大神帮我解答一下，不胜感激 发自小木虫Android客户端 |
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rabbit12510
铁虫 (小有名气)
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- 虫号: 2889263
- 注册: 2013-12-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
3楼2018-11-25 09:47:24
根本不够做转化，楼楼请问你是怎么处理上清液的呢？我现在都不敢倒了。还有你每次是做多少体系的呢？我是做的10ml得酶解体系；还有为什么我在用STC悬浮的时候溶液会变成乳白色呢（STC溶液是澄清的，配方跟大众一样）？离心完了就成了白色粘稠沉淀，镜检完全看不到原生质体了，感觉被裹住了。非常希望您的帮助。 
2楼2017-08-10 17:06:28
