24小时热门版块排行榜    

查看: 1509  |  回复: 5

18242016312

新虫 (小有名气)

[求助] 酪活力测定~福林酚法 已有1人参与

酪蛋白活力测定:采用福林酚法,以2% 酪蛋白为底物。用50 mM Tris-HCl(pH 7.5)将酶液稀释合适的倍数,取100 μl稀释好的酶液,加入同样温度的底物100 μl,恒温下反应10 min后,加入200 μl 0.4 M的三氯乙酸终止反应,在40oC下保温15 min后,10,000 rpm离心10 min,取100 μl上清液加入500 μl 0.4 M的碳酸钠,混匀后加入100 μl福林试剂,混匀后在40oC保温20 min,然后用紫外-可见吸收光谱仪测定660 nm处的吸光值。有谁知道对照组该如何处理吗?????测菌液是否有胞外表达的蛋白,用此方法,取菌液该多的转速离心?几分钟?????

@天使托 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junqing

金虫 (正式写手)

对照组,添加顺序100ul酪蛋白底物+200ul三氯乙酸+100ul酶液。可参照国标蛋白酶制剂

发自小木虫Android客户端
2楼2016-10-01 09:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangzi4eve

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

取发酵液4000 rpm离心10min,空白对照组添加顺序为:酶液—三氯乙酸——酪蛋白
3楼2016-10-05 16:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18242016312

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangzi4eve at 2016-10-05 16:23:12
取发酵液4000 rpm离心10min,空白对照组添加顺序为:酶液—三氯乙酸——酪蛋白

我用的转速10000g,是不是转速过大,会把发酵液里的可溶蛋白离心下去?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-10-06 11:24:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangzi4eve

新虫 (小有名气)

其实影响不大,转速越大离心时间越短,不过推荐转速是这个,我就按这个来的

发自小木虫Android客户端
5楼2016-10-06 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18242016312

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangzi4eve at 2016-10-06 15:34:05
其实影响不大,转速越大离心时间越短,不过推荐转速是这个,我就按这个来的

好的,多谢了!

发自小木虫Android客户端
6楼2016-10-06 22:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18242016312 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见