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真核基因在原核中的过表达酶活问题 已有3人参与
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| 黑曲霉中的β-葡萄糖苷酶基因连接在质粒pet28a，导入到大肠杆菌BL21中，实现过表达，产生的β-葡萄糖苷酶用于催化制备栀子蓝色素。通过做蛋白电泳，确认此蛋白已经实现了过表达，超声破碎取其上清测酶活，加NaCO3终止反应时不显黄色，两天以后才开始显黄色，用一步法制备栀子蓝时，颜色呈绿色或黄色。是因为酶活很低吗？显黄色的过程怎么滞后了呢？也是由于酶活吗？用原核载体表达真核基因时本身就存在各种问题，怎么改进才能正确表达？求各位大神指教，不胜感激~~~ |
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β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母表达活性可以，可以试试 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-11-06 18:24:25