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speculiar

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[交流] 有关大肠杆菌的表达量低的问题

我在做一个酶的表达，能测出酶活，但是跑蛋白胶看不到目的条带，换了两次宿主都是这样。我用的是T7启动子，照理说表达量应该非常高才对。请问是怎么回事啊？
是不是因为存在稀有密码子呢？

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1楼 2008-11-23 09:44:56

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humants

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既然有酶活，就说明与稀有密码子关系不大了，若是稀有密码子原因，他表达出的蛋白就是不完整的，不可能有活性。

试着改一下发酵条件，做个正交试验。

5楼2008-11-26 09:14:56

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翱天

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加点表达诱导剂试试？

路过。。。

2楼2008-11-23 11:06:57

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speculiar

银虫 (小有名气)

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我的IPTG浓度一般都控制在1mM，应该足够了吧。

3楼2008-11-23 11:52:56

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liumikewolf

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是不是菌株老化? 划线挑单菌落试一下吧

4楼2008-11-26 08:45:17

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