24小时热门版块排行榜    

查看: 756  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

speculiar

银虫 (小有名气)

[交流] 有关大肠杆菌的表达量低的问题

我在做一个酶的表达,能测出酶活,但是跑蛋白胶看不到目的条带,换了两次宿主都是这样。我用的是T7启动子,照理说表达量应该非常高才对。请问是怎么回事啊?
是不是因为存在稀有密码子呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liumikewolf

金虫 (小有名气)

是不是菌株老化? 划线挑单菌落试一下吧
4楼2008-11-26 08:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

翱天

新虫 (初入文坛)

加点表达诱导剂试试?
路过。。。
2楼2008-11-23 11:06:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speculiar

银虫 (小有名气)

我的IPTG浓度一般都控制在1mM,应该足够了吧。
3楼2008-11-23 11:52:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humants

金虫 (正式写手)

既然有酶活,就说明与稀有密码子关系不大了,若是稀有密码子原因,他表达出的蛋白就是不完整的,不可能有活性。

试着改一下发酵条件,做个正交试验。
5楼2008-11-26 09:14:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见