24小时热门版块排行榜    

查看: 780  |  回复: 5

cy6483289

新虫 (初入文坛)

[交流] Sf9蛋白表达遇到的很郁闷的问题,求大神们过来指导一下, 好累,做了4个月了!! 已有1人参与

本人小白,想用昆虫细胞表达我的蛋白,质粒Pfast-dual。蛋白为PRRSV的N蛋白(123aa)。胞内表达,通过冻融法获取胞内蛋白,拯救出了P1代和P2代毒,(病毒放在4度中保存)。前面的结果还算可以,但是做到P3代毒的时候,蛋白出现了弥散的情况,相同条件下蛋白好像越来越少。求大神指导下
具体关键步骤

接毒6孔板,每个孔50ul。

培养时间6天(不区分代次)。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy6483289

新虫 (初入文坛)

附上结果图
Sf9蛋白表达遇到的很郁闷的问题,求大神们过来指导一下, 好累,做了4个月了!!
p1代毒WB结果,抗体会单抗

2楼2016-09-24 14:49:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy6483289

新虫 (初入文坛)

第二代毒结果。分别是p2-1,p2-2,上清,marker 阳性对照,阴性对照
Sf9蛋白表达遇到的很郁闷的问题,求大神们过来指导一下, 好累,做了4个月了!!-1
2016-9-5-N-p2-1.jpg

3楼2016-09-24 14:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy6483289

新虫 (初入文坛)

第三代毒结果 样品顺序 p3-1 p3-1 p3-2 p3-2 maker 超声上清,阳性对照,阴性对照。 目的蛋白是最下方的蛋白。
Sf9蛋白表达遇到的很郁闷的问题,求大神们过来指导一下, 好累,做了4个月了!!-2
2016-9-23-N.jpg

4楼2016-09-24 14:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cy6483289

新虫 (初入文坛)

目的蛋白15kd。有磷酸化,会形成多聚体结构。用的抗体是单抗,有His标签,His单抗做出来的结果也是差不多的,不上图了。求大神指导,求大神!!!
5楼2016-09-24 14:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们公司可以做该表达技术服务

发自小木虫Android客户端
6楼2016-09-25 09:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cy6483289 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 5+3 想要一壶桃花水 2026-03-25 7/350 2026-03-26 03:29 by sjeidudkso
[考研] 274求调剂 +10 顾九笙要谦虚 2026-03-24 14/700 2026-03-26 01:09 by 15366876211
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 312求调剂 +5 上岸吧ZJY 2026-03-22 7/350 2026-03-25 22:20 by 544594351
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 11/550 2026-03-25 10:23 by userper
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见