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Sf9蛋白表达遇到的很郁闷的问题,求大神们过来指导一下, 好累,做了4个月了!! 已有1人参与
本人小白,想用昆虫细胞表达我的蛋白,质粒Pfast-dual。蛋白为PRRSV的N蛋白(123aa)。胞内表达,通过冻融法获取胞内蛋白,拯救出了P1代和P2代毒,(病毒放在4度中保存)。前面的结果还算可以,但是做到P3代毒的时候,蛋白出现了弥散的情况,相同条件下蛋白好像越来越少。求大神指导下
具体关键步骤
接毒6孔板,每个孔50ul。
培养时间6天(不区分代次)。 |
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