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求问各位SSR和PAGE电泳以及相关PCR反应的一些问题！！~么么哒 已有8人参与
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本人在做SSR和遗传 多样性的实验，这是8%的非变性page，电压170V跑的。之后银染色 有很多影子条带导致不能区分目的条带（最后是2000BP的marker虽然太大将就着用了），求问各位如何优化pcr条件能够去除影子带。 ddH2O 17 rtaq 0.3 buffer（mg2+ free） 2.5 dNTP 1.2 MgCl2 1 F 1 R 1 基因组 1  IMG_2191.JPG |
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我本科毕业论文也做的SSR分子鉴定，植物的。也是25ul体系的，非变性和变性差不多。我用的6%的胶，1400V，设定的70mA，大概1.5h跑完。看你的应该也做的64孔或者96孔的吧，个人观点，1，你的体系中DNA量有点大，我不知道你到底有多少ng的DNA，这个也不能确定你加多了。2，你的胶都黄成这样了，还有条带都黑成这个样，染色是一定过度了。我记得我好像是千分之二的硝酸银，初次配的染色2到3分钟就可以显色，用过3到4次后，5分钟左右显色。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-09-25 15:27:35
6楼2016-09-25 15:32:35
7楼2016-09-25 22:27:20
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10楼2016-09-26 10:21:41