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zhanglan132

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物DNA提取后跑电泳为什么出现这种情况??已有5人参与

提取食用菌DNA,想跑电泳看看DNA提取情况,但是为什么会出现这种情况呢??我用的是1×TAE缓冲液,110V,跑了45min。是不是电泳条件有问题?有没有更适合的电泳条件??还是提取的问题呢??我用的是CTAB法提取的。望各位解答

植物DNA提取后跑电泳为什么出现这种情况??
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-26 22:50:39
食用菌多糖含量比较高,还有糖蛋白,不易去除,导致提取样品粘度大,Dna与蛋白结合在一起,跑不出来,停在点样孔附近,建议你多抽提,尽量去除蛋白和多糖污染。

发自小木虫Android客户端
10楼2016-09-24 11:33:41
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zhanglan132

铜虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:00
引用回帖:
2楼: Originally posted by 过烟云烟 at 2016-09-22 20:31:08
DNA没跑出孔,还有点弥散,裂解不完全DNA与蛋白质没有完全分开所以在孔处比较亮,你的胶浓度多大,marker跑的太久了有可能是marker不对

胶的浓度是1.2%,如果不跑45min,30分钟的时候,有些条带marker根本跑不开
4楼2016-09-23 20:16:58
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普通回帖

过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-23 22:17:01
DNA没跑出孔,还有点弥散,裂解不完全DNA与蛋白质没有完全分开所以在孔处比较亮,你的胶浓度多大,marker跑的太久了有可能是marker不对

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once you've accepted your flaws, no one can use them against you.
2楼2016-09-22 20:31:08
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hattie919822

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-23 22:17:20
应该是蛋白残留,建议提取的时候注意操作,减少蛋白样残留
不见不知不伴不惜不
3楼2016-09-23 17:41:53
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zhanglan132

铜虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:12
引用回帖:
3楼: Originally posted by hattie919822 at 2016-09-23 17:41:53
应该是蛋白残留,建议提取的时候注意操作,减少蛋白样残留

用CTAB法提取的时候,每次上清液都取不完,每次取一部分上清液会影响最后DNA浓度吗??
5楼2016-09-23 20:19:03
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wsywxs

木虫 (正式写手)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:38
dna不分降解,可重新提取,或者换方法。

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6楼2016-09-23 20:37:31
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:46
楼主的电泳没有带,从新开始提取吧。

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7楼2016-09-24 00:35:24
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhanglan132 at 2016-09-23 20:16:58
胶的浓度是1.2%,如果不跑45min,30分钟的时候,有些条带marker根本跑不开...

DNA用1.2的胶不合适,一般用0.6~0.8的

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once you've accepted your flaws, no one can use them against you.
8楼2016-09-24 01:49:04
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C小杨

新虫 (初入文坛)

DNA应该没提出来,胶孔那里的是蛋白等杂质

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9楼2016-09-24 10:57:59
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