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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 植物DNA提取后跑电泳为什么出现这种情况？？
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zhanglan132

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物DNA提取后跑电泳为什么出现这种情况？？ 已有5人参与

提取食用菌DNA，想跑电泳看看DNA提取情况，但是为什么会出现这种情况呢？？我用的是1×TAE缓冲液，110V，跑了45min。是不是电泳条件有问题？有没有更适合的电泳条件？？还是提取的问题呢？？我用的是CTAB法提取的。望各位解答

植物DNA提取后跑电泳为什么出现这种情况？？
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1楼 2016-09-22 19:48:12
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-26 22:50:39
食用菌多糖含量比较高，还有糖蛋白，不易去除，导致提取样品粘度大，Dna与蛋白结合在一起，跑不出来，停在点样孔附近，建议你多抽提，尽量去除蛋白和多糖污染。

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10楼2016-09-24 11:33:41
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zhanglan132

铜虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:00
引用回帖:
2楼: Originally posted by 过烟云烟 at 2016-09-22 20:31:08
DNA没跑出孔，还有点弥散，裂解不完全DNA与蛋白质没有完全分开所以在孔处比较亮，你的胶浓度多大，marker跑的太久了有可能是marker不对

胶的浓度是1.2%，如果不跑45min，30分钟的时候，有些条带marker根本跑不开
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4楼2016-09-23 20:16:58
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普通回帖

过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-23 22:17:01
DNA没跑出孔，还有点弥散，裂解不完全DNA与蛋白质没有完全分开所以在孔处比较亮，你的胶浓度多大，marker跑的太久了有可能是marker不对

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不要因为别人交卷了，就乱选答案
2楼2016-09-22 20:31:08
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hattie919822

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-23 22:17:20
应该是蛋白残留，建议提取的时候注意操作，减少蛋白样残留
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不见不知不伴不惜不
3楼2016-09-23 17:41:53
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zhanglan132

铜虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:12
引用回帖:
3楼: Originally posted by hattie919822 at 2016-09-23 17:41:53
应该是蛋白残留，建议提取的时候注意操作，减少蛋白样残留

用CTAB法提取的时候，每次上清液都取不完，每次取一部分上清液会影响最后DNA浓度吗？？
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5楼2016-09-23 20:19:03
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wsywxs

木虫 (正式写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:38
dna不分降解，可重新提取，或者换方法。

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6楼2016-09-23 20:37:31
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:46
楼主的电泳没有带，从新开始提取吧。

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7楼2016-09-24 00:35:24
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-24 07:46:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhanglan132 at 2016-09-23 20:16:58
胶的浓度是1.2%，如果不跑45min，30分钟的时候，有些条带marker根本跑不开...

DNA用1.2的胶不合适，一般用0.6～0.8的

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不要因为别人交卷了，就乱选答案
8楼2016-09-24 01:49:04
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C小杨

新虫 (初入文坛)
DNA应该没提出来，胶孔那里的是蛋白等杂质

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9楼2016-09-24 10:57:59
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