应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真核表达
51/1返回列表
查看: 1840  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

苓宁988

新虫 (小有名气)

[求助] 真核表达 已有1人参与

克隆病毒的某个非结构蛋白后做真核表达，一直不顺利！这是我最近连接pCAGGS后的一个重组质粒，酶切和测序都正确，转染293T细胞后做的IFA，标签是Flag，但是不明白为什么我的蛋白表达看着不是在细胞质，而且感觉这么不太正常呢？明年要毕业了，实验还是不顺利，急死了，希望大神指导，谢谢！

真核表达
4ug-4.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-20 11:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苓宁988

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ConnConn at 2016-09-21 22:29:55
除了定位你还有别的数据吗，比如互作蛋白或者共定位？有些病毒蛋白定位亚细胞结构的！

我现在想先确定这个蛋白能否表达成功，然后再进行蛋白互作实验呢，所以别的数据基本没有。有个情况就是，我的这个基因连接到pCAGGSS上加大转染剂量能观察到上图结果，但是换个基因（相同病毒的另外的非结构蛋白基因）转染，IFA结果还不如上图，甚至就直接没有。期间也换过pEGFP-C1载体（重组质粒测序、酶切都对），但是结果还是不行，不知道怎么回事？
    还有一个问题是，别人转染后观察细胞都能看到质粒和脂质体的混合物（小点样的东西），但我的转染后却观察不到，这种情况是不是会直接影响了转染，导致质粒基本就没有进入细胞啊？
赞一下 回复此楼
9楼2016-09-22 10:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以提供该技术服务

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-09-20 14:23:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苓宁988

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2016-09-20 14:23:26
我们公司可以提供该技术服务

请问是什么公司？
赞一下 回复此楼
3楼2016-09-20 14:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)
北京艾普希隆生物科技有限公司

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-09-20 14:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭