15楼: Originally posted by lyzjc at 2016-10-13 19:46:39
谢谢各位回复。
经自己的不断重复摸索，成功连接了一个，并且成功测序。今天做的菌液PCR鉴定也成功扩增出阳性克隆，已送去测序。

1、克隆相关的试剂一个都没有更换。
2、怀疑连接时间不够，把连接时间增加到6h ...

23楼: Originally posted by 彭江容 at 2016-11-07 20:56:29
同新人一枚，楼主你看我看看我的问题在哪里吧！我做的菌长出来了，做了菌液pcr，然后电泳检测，发现有特异性条带，但是测序后做序列比对差了很多，这是什么原因呢？谢谢！
...

33楼: Originally posted by bnblxg at 2017-02-20 14:39:08
楼主，你好！最近我也在做TA克隆，连接效率不高，几乎没有！在AMP平板上能长出蓝白斑，可白斑基本全是假阳性，求指导哈！
PCR扩增产物1%琼脂糖凝胶电泳，试剂盒回收纯化PCR产物，电泳检测条带单一，浓度为46ng/微 ...

4楼: Originally posted by lyzjc at 2016-09-21 15:44:27
自己顶一下吧

又做了一次，加了对照组，对照组菌落铺满了平板，而实验组零星的菌落，摇菌中，祝我成功。

36楼: Originally posted by HOTSTAR at 2017-03-18 10:53:03
有具体的试验步骤和心得没 做了好几个 星期 啥都没有  心累啊...

15楼: Originally posted by lyzjc at 2016-10-13 19:46:39
谢谢各位回复。
经自己的不断重复摸索，成功连接了一个，并且成功测序。今天做的菌液PCR鉴定也成功扩增出阳性克隆，已送去测序。

1、克隆相关的试剂一个都没有更换。
2、怀疑连接时间不够，把连接时间增加到6h ...