应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR条带
141/2返回列表12下一页
查看: 1443  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

竹在心间

银虫 (小有名气)

[求助] PCR条带 已有5人参与

目的片段308～出现了非特异性扩增怎么办，最后一个是 actin还有就是觉得条带太亮太粗怎么办？

PCR条带


PCR条带-1


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-18 22:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-19 08:17:17
Q1：引物设计有问题，建议设计完成后使用UCSC进行电子PCR检测是否有非特异性扩增，或者进行梯度PCR优化退火温度；
Q2：Actin亮的原因有几个：一是模板量较大（或者其中含有的actin较多）；二是PCR循环数较大；三是电泳时上样量太多；
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

竹在心间
坚持到底就是胜利！
3楼2016-09-18 23:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-19 08:17:11
本帖内容被屏蔽
2楼2016-09-18 23:52:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

RFGE

新虫 (正式写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 08:17:22
三楼分析很全

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
4楼2016-09-19 00:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

010308Jing

木虫 (正式写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 08:17:26
楼上回答好完美

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2016-09-19 06:13:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-19 08:17:32
做个巢式PCR,先扩出外面的，在用现在的引物P.
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
6楼2016-09-19 08:13:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹在心间

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-18 23:59:01
Q1：引物设计有问题，建议设计完成后使用UCSC进行电子PCR检测是否有非特异性扩增，或者进行梯度PCR优化退火温度；
Q2：Actin亮的原因有几个：一是模板量较大（或者其中含有的actin较多）；二是PCR循环数较大；三是 ...

康沙咪哒～我再试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-09-19 08:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹在心间

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-18 23:59:01
Q1：引物设计有问题，建议设计完成后使用UCSC进行电子PCR检测是否有非特异性扩增，或者进行梯度PCR优化退火温度；
Q2：Actin亮的原因有几个：一是模板量较大（或者其中含有的actin较多）；二是PCR循环数较大；三是 ...

你好！麻烦再帮我看下吧！上次退火温度是56这是提高到58的效果请问还要改变什么体系？
PCR条带-2



发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-09-19 13:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贾子阳009

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 竹在心间 at 2016-09-19 13:10:21
你好！麻烦再帮我看下吧！上次退火温度是56这是提高到58的效果请问还要改变什么体系？

...

估计要重新设计引物了吧，还有就是你要确定你设计引物用的那个序列和你的这个模版是匹配的。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-09-20 08:43:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹在心间

银虫 (小有名气)
首先要谢谢你！我已经验证过是匹配的了，而且在 NCBI上 blast过了引物是特异性的…我今天又做了个梯度再看看吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-09-20 10:47:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 竹在心间 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 10:38 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 09:38 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:49 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:26 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:13 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-15 05:00 by mibUvS8DDCwf
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭