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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 如何实验证明某一蛋白影响某一转录因子？
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秦俊超527

新虫 (小有名气)

[求助] 如何实验证明某一蛋白影响某一转录因子？ 已有2人参与

蛋白可能通过某个通路来影响转录因子的表达，初步试验是想验证一下蛋白与转录因子是否存在联系，请问有什么办法来验证?
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1楼 2016-09-17 16:27:45
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-18 09:04:57
如果是转录因子的话，肯定调控某个基因转录，你把那个基因的启动子区域拿出来做个luciferase的质粒
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2016-09-18 00:31:51
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秦俊超527

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2016-09-18 00:31:51
如果是转录因子的话，肯定调控某个基因转录，你把那个基因的启动子区域拿出来做个luciferase的质粒

我是说如果某个蛋白影响转录因子，该如何验证？
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3楼2016-09-18 12:32:52
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-21 19:37:00
我觉得最简单的方法是直接看该蛋白的缺失突变体中该基因的表达情况。

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不是优秀，而是不可替代
4楼2016-09-18 12:52:57
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guduyiyu

金虫 (正式写手)
EMSA

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不努力永远不知道自己有多优秀
5楼2016-09-19 13:59:42
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以做EMSA技术服务

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6楼2016-09-19 17:11:31
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kofu121

金虫 (小有名气)
间接观测对其下游基因表达影响

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组织工程骨
7楼2016-09-20 08:23:54
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C小杨

新虫 (初入文坛)
酵母单杂交

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8楼2016-09-21 10:02:58
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秦俊超527

新虫 (小有名气)
该蛋白很有可能并不是直接作用于转录因子，因此只能看该蛋白是否影响该转录因子的转录以及表达量了是吧？
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9楼2016-09-21 17:10:47
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)
★
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-21 19:37:51
先进行预测，如果预测该蛋白直接可以作用于转录因子就用荧光素酶报告检测，如果不是直接作用，就用基因敲除该蛋白检测转录因子变化

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once you've accepted your flaws, no one can use them against you.
10楼2016-09-21 18:37:30
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