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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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熊猫爱吃竹子

新虫 (小有名气)

[求助] 大提质粒时如何提高质粒浓度? 已有7人参与

用thermo的试剂盒从150ml菌液中提质粒,最后用nano测只有200多ng/ml,别人一般都能提到900ng/ml左右,请问一下有什么需要注意的地方吗,在操作过程中?谢谢

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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-22 22:22:16
和质粒拷贝数有关系,确定你的质粒是不是低拷贝的~够用即可,没必要纠结
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
11楼2016-09-21 08:49:48
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-22 22:20:17
我们大提质粒是自己配试剂直接用碱裂解法提,用的15ml离心管。试剂盒中吸附柱挂载量有限,你可以前面步骤用试剂盒的试剂,不要过柱,用无水乙醇沉淀,得率应该会提高。
2楼2016-09-18 01:08:51
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liling0601

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用的天根的试剂盒,150ML的菌液一般能抽1mg左右
3楼2016-09-18 11:27:11
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010308Jing

木虫 (正式写手)

其实这个跟质粒还是有关系的,你保留点之前的菌液直接扩大会比重新挑克隆好很多

发自小木虫Android客户端
4楼2016-09-18 11:55:55
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