| 查看: 1611 | 回复: 1 | ||
[求助]
pcr基因扩增，电泳时只跑出了二聚体 已有1人参与
|
用1%的琼脂糖凝胶电泳，只跑出了二聚体而且条带不是很明亮，dna和引物都没有问题，是否需要调整一下温度？还有，DNA凝胶电泳时加入阳性对照，确保不是DNA凝胶和PCR程序的问题，怎么做阳性对照，能否详细的说一下怎么加？  发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有69人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:10:56
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:10:56
|
Q1：产生印务二聚体的原因有以下几个可能： 1，引物设计本身存在问题，容易出现问题，引物设计完成后可以使用oligo检测设计引物； 2，引物设计没有问题，但是退火温度不适合，可以做梯度PCR，寻找最佳退火温度； 3，引物设计没有问题，但是模板浓度很低，也容易造成引物二聚体形成； Q2：阳性对照指的是已知的肯定可以PCR成功的样品以及引物，从而验证体系是否OK，具体做的话，你可以用之前的DNA和常做的基因引物单独做一个孔就行的。 |
2楼2016-09-09 08:34:19
