| 查看: 1627 | 回复: 1 | ||
[求助]
pcr基因扩增，电泳时只跑出了二聚体 已有1人参与
|
用1%的琼脂糖凝胶电泳，只跑出了二聚体而且条带不是很明亮，dna和引物都没有问题，是否需要调整一下温度？还有，DNA凝胶电泳时加入阳性对照，确保不是DNA凝胶和PCR程序的问题，怎么做阳性对照，能否详细的说一下怎么加？  发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有89人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:10:56
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:10:56
|
Q1：产生印务二聚体的原因有以下几个可能： 1，引物设计本身存在问题，容易出现问题，引物设计完成后可以使用oligo检测设计引物； 2，引物设计没有问题，但是退火温度不适合，可以做梯度PCR，寻找最佳退火温度； 3，引物设计没有问题，但是模板浓度很低，也容易造成引物二聚体形成； Q2：阳性对照指的是已知的肯定可以PCR成功的样品以及引物，从而验证体系是否OK，具体做的话，你可以用之前的DNA和常做的基因引物单独做一个孔就行的。 |
2楼2016-09-09 08:34:19