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pcr基因扩增，电泳时只跑出了二聚体 已有1人参与
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用1%的琼脂糖凝胶电泳，只跑出了二聚体而且条带不是很明亮，dna和引物都没有问题，是否需要调整一下温度？还有，DNA凝胶电泳时加入阳性对照，确保不是DNA凝胶和PCR程序的问题，怎么做阳性对照，能否详细的说一下怎么加？  发自小木虫IOS客户端 |
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kuaile5420
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【答案】应助回帖
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:10:56
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Q1：产生印务二聚体的原因有以下几个可能： 1，引物设计本身存在问题，容易出现问题，引物设计完成后可以使用oligo检测设计引物； 2，引物设计没有问题，但是退火温度不适合，可以做梯度PCR，寻找最佳退火温度； 3，引物设计没有问题，但是模板浓度很低，也容易造成引物二聚体形成； Q2：阳性对照指的是已知的肯定可以PCR成功的样品以及引物，从而验证体系是否OK，具体做的话，你可以用之前的DNA和常做的基因引物单独做一个孔就行的。 |
2楼2016-09-09 08:34:19