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荧光定量pcr做病毒rna的定量采用一步法还是两步法会比较好？ 已有1人参与
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本人刚接触荧光定量pcr不久，课题是研究病毒的测定方法优化。然后现在课题开展后遇到一个问题 本人研究的病毒为RNA结构，但是定量时候采用的是质粒，是DNA结构，两者起步不一样，可以在做RT-qPCR的时候用一步法直接做实验吗？这样出来的结果有没有信服性？ 若采用一步法，到时候是质粒和RNA样品一同反应经过逆转录阶段吗？这样会对质粒产生影响吗?还是说要先将DNA结构的质粒先体外转录成RNA结构，再进行同起步的研究？还是说用两步法才更具信服力？但是两步法容易增加样品受感染几率，所以很是纠结采用哪一种。 希望有大神可以帮忙解开困惑。 |
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