24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1113  |  回复: 12
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 文又雨 的 3 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

文又雨

铁虫 (初入文坛)

[交流] 要扩增1KB的目的片断,PCR反应条件最好是什么呢?

我要扩增的目的片断是1KB,我现在PCR用的反应条件是94度5min,94度1min,50度1min,72度2min,35个循环 ,再72度7min,可是现在都P不出目的条带来,是我的反应条件有问题吗?反应条件最好是怎么样的呢?谢谢各位大侠了。

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-3 at 15:26 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yhxiang

金虫 (小有名气)

在确认你的模板没有问题的情况下做梯度PCR找出合适的退火温度,如果梯度pcr都没有目的条带的话就是你用的酶和buffer有问题了
向往从容淡定的生活
7楼2008-11-20 16:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

xuedan0721

铜虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-15 11:05
个人建议,变性时间短点,45s, 94 5 min , 94 45s, 50 45s, 72 1min.
2楼2008-11-19 16:52:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

首先确认模板、引物没问题
再不行就是酶的问题
3楼2008-11-19 18:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whh1984

金虫 (小有名气)

有些时候做不出来也是很正常的,我也经常遇到做不出的时候
适当调整一下你的实验参数试试吧。不止是pcr反应条件,可以调整一下反应体系试试
4楼2008-11-19 21:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +3 @taotao 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:50 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +3 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:35 by 求调剂zz
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见