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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相摸条件
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cyr001

银虫 (著名写手)

[交流] 液相摸条件

梯度摸条件，60分钟5-95的乙腈，我要的两个峰45分钟左右刚好基线分离，求大神交缩短分离时间的方法

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1楼 2016-08-31 11:18:46
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lcx633123

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cyr001: 金币+5 2016-09-02 00:00:58
cyr001: 金币+5 2016-12-25 11:13:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by cyr001 at 2016-08-31 12:02:49
起始条件为5%的乙腈，60分钟后95%乙腈，出峰时间45分钟左右。

一般走梯度是这么考虑的：水相越高，出峰时间越长，但分离越好；有机相越高，出峰时间越短，分离越差；但可以利用样品酸碱性，在流动相中调节，使之峰形更好（减少前沿或拖尾，从而达到分离度要求）。
像你的情况，可以先高有机相比如乙腈：水（90：10）走等度大概确定样品在多少分钟出峰，然后再在此基础上提前5分钟改为梯度走。
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思想有多暴烈，现实就有多收敛。
4楼2016-08-31 13:40:17
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lcx633123

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cyr001: 金币+5, 谢谢 2016-09-02 00:00:02
描述得很不清楚呀。开始流动相是乙腈：水（5:95）么？还有以你的梯度洗脱，出峰时间是60min？还是说这个方法60min，但出峰时间没说。
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思想有多暴烈，现实就有多收敛。
2楼2016-08-31 12:00:17
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cyr001

银虫 (著名写手)
起始条件为5%的乙腈，60分钟后95%乙腈，出峰时间45分钟左右。

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3楼2016-08-31 12:02:49
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crystalxu

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cyr001: 金币+5 2016-09-02 00:01:17
cyr001: 金币+5 2016-12-25 11:13:04
你可以试试不同的色谱柱，如果你用的是C18，换成苯基柱试试，氨基柱也试试，这是最简单的方法。
单纯从流动相的角度，可以在流动相里先加三氟乙酸有机酸试试，浓度0.05%先试试，不行可以试试二乙胺等有机碱试试，但注意你流动相的PH，现在的色谱柱一般都是PH2-9,超过9的话色谱柱会不可逆的毁坏的。
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明天会更好
6楼2016-09-01 21:06:46
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