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我才是园子

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!求解答!划线培养的真菌提取DNA,PCR后有目的条带,但转接后的真菌却无目的条带已有1人参与

我是从茭白组织中培养的黑粉菌,做了一个半月终于做出来了,将划线的菌进行转接到新的培养基上后,液氮研磨提取DNA,PCR验证有目的条带,也将菌液送去公司测序,测序结果与基因BANK上同源性很高(因为做的不是一个品种),但是问题来了,我提取了两次转接后的黑粉菌的DNA,PCR却没有目的条带了,这是怎么回事啊?我同学说是划线的菌里面本来就有杂菌,可能我挑的不是黑粉菌呢?可是划线培养不就是让菌纯化吗?真的很着急,不知道问题出在哪里,求高手解答,万分感激
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
“将划线的菌进行转接到新的培养基上后“
试试把原始保存的菌重新活化
2楼2016-08-30 16:41:23
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我才是园子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2016-08-30 16:41:23
“将划线的菌进行转接到新的培养基上后“
试试把原始保存的菌重新活化

没有原始保存的菌,因为这个真菌是从植物组织放在培养基上长的,划线的菌就相当于原始的菌了,而且不停的做下一批,原来长出菌的植物组织培养皿已经清洗掉了
3楼2016-08-30 21:11:41
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