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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急!求解答！划线培养的真菌提取DNA,PCR后有目的条带,但转接后的真菌却无目的条带
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我才是园子

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!求解答！划线培养的真菌提取DNA,PCR后有目的条带,但转接后的真菌却无目的条带 已有1人参与

我是从茭白组织中培养的黑粉菌，做了一个半月终于做出来了，将划线的菌进行转接到新的培养基上后，液氮研磨提取DNA，PCR验证有目的条带，也将菌液送去公司测序，测序结果与基因BANK上同源性很高（因为做的不是一个品种），但是问题来了，我提取了两次转接后的黑粉菌的DNA，PCR却没有目的条带了，这是怎么回事啊？我同学说是划线的菌里面本来就有杂菌，可能我挑的不是黑粉菌呢？可是划线培养不就是让菌纯化吗？真的很着急，不知道问题出在哪里，求高手解答，万分感激
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1楼 2016-08-29 21:38:54
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
“将划线的菌进行转接到新的培养基上后“
试试把原始保存的菌重新活化
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2楼2016-08-30 16:41:23
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我才是园子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2016-08-30 16:41:23
“将划线的菌进行转接到新的培养基上后“
试试把原始保存的菌重新活化

没有原始保存的菌，因为这个真菌是从植物组织放在培养基上长的，划线的菌就相当于原始的菌了，而且不停的做下一批，原来长出菌的植物组织培养皿已经清洗掉了
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3楼2016-08-30 21:11:41
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