24小时热门版块排行榜    

查看: 1302  |  回复: 5

tydjack

新虫 (初入文坛)

[求助] 癌细胞在水凝胶上不贴,求助 已有2人参与

我做的是NIPAAm型的细胞脱附温敏水凝胶,考虑到NIP本身生物相容性不好,我又加了点OEGMA进行混聚。但是交联剂不溶于水,所以我是先做成有机凝胶然后脱模把凝胶泡水里,每天换水。3-4天后等溶剂完全置换成水了把水凝胶转移到孔板里,泡75%无菌乙醇进行消毒(超净台内操作)。之后把乙醇吸去,泡PBS把残留的乙醇洗掉(PBS泡两天,每天换水)。用培养基预孵后接种癌细胞,密度为10000cell/mL。
      实验做了好多遍可癌细胞就是不贴,凝胶上的癌细胞都是圆圆的,而孔板底部的癌细胞贴的很牢(凝胶尺寸比孔板略小一点)。
      我很苦恼,求大神为我指点迷津
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liubin

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
泡75%无菌乙醇进行消毒(超净台内操作)。
75%乙醇是杀菌用的所以不需要采用无菌乙醇的提法。
乙醇没有完全清洗干净,细胞的粘附要受很大影响。
不知道你在乙醇里面泡了多久,如果是材料表面灭菌,泡几秒钟就可以,如果你希望乙醇渗透入凝胶里面杀菌,乙醇进去容易,洗脱难!
或许你可以用含500IU/mL双抗的PBS代替乙醇灭菌试试。
2楼2016-08-25 09:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhy33385

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是因为乙醇的话,你可以在制胶前把所有的材料都灭菌
3楼2016-08-26 09:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

firebolt

铁杆木虫 (著名写手)

OEGMA你加了多少,这玩意儿本身就是抗吸附的,加多了细胞不贴很正常

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-08-27 04:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tydjack

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by firebolt at 2016-08-27 04:09:29
OEGMA你加了多少,这玩意儿本身就是抗吸附的,加多了细胞不贴很正常

18mg/ml 加这个是为了增加点生物相容性
5楼2016-09-05 15:00:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风亦寒

铜虫 (初入文坛)

6楼2016-09-06 09:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tydjack 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +3 XQTJZ 2026-03-26 3/150 2026-03-26 20:17 by barlinike
[考研] 312求调剂 +8 上岸吧ZJY 2026-03-22 12/600 2026-03-26 18:49 by muchong357
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见