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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 前处理 » 发卡DNA为什么退火后还是不能闭合起来
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试管杨

新虫 (小有名气)

[求助] 发卡DNA为什么退火后还是不能闭合起来 已有1人参与

我最近买了一个MB序列，两段有5个碱基的互补，并且两段修饰了FAM和熄灭集团，可是发现荧光信号老强了，就是不灭，这是什么情况？求大神告知，改怎么处理

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1楼 2016-08-24 15:00:31
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chenj-315

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 试管杨 at 2016-08-25 14:52:16
退过火了，但是loop区域的DNA序列有16个碱基，stem区域有5个碱基对
...

‘环序列比较长，茎五个算短了，你这个分子信标TM值估计只有60度左右，请问你的反应温度大概多少呢？如果反应温度太高，背景可能会很大。

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9楼2016-08-25 18:26:16
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xincer

木虫 (小有名气)
有些公司合成的分子信标确实背景会比较大

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2楼2016-08-24 15:17:39
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chenj-315

银虫 (正式写手)
环序列长度有多少？另外买回来之后做了变性退火处理没有？

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3楼2016-08-24 15:17:53
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试管杨

新虫 (小有名气)
求告知

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4楼2016-08-25 14:30:24
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