24小时热门版块排行榜    

查看: 2357  |  回复: 12

试管杨

新虫 (小有名气)

[求助] 发卡DNA为什么退火后还是不能闭合起来 已有1人参与

我最近买了一个MB序列,两段有5个碱基的互补,并且两段修饰了FAM和熄灭集团,可是发现荧光信号老强了,就是不灭,这是什么情况?求大神告知,改怎么处理

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xincer

木虫 (小有名气)

有些公司合成的分子信标确实背景会比较大

发自小木虫Android客户端
2楼2016-08-24 15:17:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

1.取相同浓度分析信标和不标记淬灭基团的核酸,验证下是否有淬灭。

发自小木虫Android客户端
6楼2016-08-25 16:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenj-315

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 试管杨 at 2016-08-25 14:52:16
退过火了,但是loop区域的DNA序列有16个碱基,stem区域有5个碱基对
...

‘环序列比较长,茎五个算短了,你这个分子信标TM值估计只有60度左右,请问你的反应温度大概多少呢?如果反应温度太高,背景可能会很大。

发自小木虫Android客户端
9楼2016-08-25 18:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenj-315

银虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 试管杨 at 2016-08-26 08:04:11
开始弄了75然后没什么效果,后面弄了90也没什么效果
...

反正温度如果太高,把茎碱基对个数加多

发自小木虫Android客户端
11楼2016-08-26 10:24:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

chenj-315

银虫 (正式写手)

环序列长度有多少?另外买回来之后做了变性退火处理没有?

发自小木虫Android客户端
3楼2016-08-24 15:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

试管杨

新虫 (小有名气)

4楼2016-08-25 14:30:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

试管杨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenj-315 at 2016-08-24 15:17:53
环序列长度有多少?另外买回来之后做了变性退火处理没有?

退过火了,但是loop区域的DNA序列有16个碱基,stem区域有5个碱基对

发自小木虫Android客户端
5楼2016-08-25 14:52:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

2.你的核酸序列我看基本问题不大,!五个茎加一个淬灭荧光的共价作用维持茎部稳定。但这所有的都只是预测,实际上可能不是如此。

发自小木虫Android客户端
7楼2016-08-25 16:53:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

3.淬灭集团对荧光团的淬灭能力与距离和淬灭团淬灭能力有关。淬灭效率大概在九成,按我说的第一天计算下淬灭效率大概是多少。

发自小木虫Android客户端
8楼2016-08-25 16:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

试管杨

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by chenj-315 at 2016-08-25 18:26:16
‘环序列比较长,茎五个算短了,你这个分子信标TM值估计只有60度左右,请问你的反应温度大概多少呢?如果反应温度太高,背景可能会很大。
...

开始弄了75然后没什么效果,后面弄了90也没什么效果

发自小木虫Android客户端
10楼2016-08-26 08:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 试管杨 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见