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circRNA荧光定量PCR技术
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circRNA荧光定量PCR实验 circRNA是通过特殊的选择性剪切产生封闭环状结构的非编码RNA。circRNA不受RNA外切酶的影响,比线性RNA表达更稳定。研究表明,某些特殊的circRNA分子富含 miRNA结合位点,在细胞中起到miRNA sponges的作用,进而解除 miRNA 对其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含 63 个保守的 miR-7结合位点,该circRNA在细胞中能够有效吸附miR-7。而miR-7 作为关键调节因子广泛参与癌症途径,如抑制在乳腺癌、胶质瘤等癌症中表达显著上调的Pak1的表达;miR-7 也能通过结合α-synuclein抑制其表达。这些研究暗示ciRS-7通过ceRNA机制调节miR-7的功能,是神经系统疾病和癌症治疗的潜在靶点。 CirRNA定量PCR实验流程如下: 1、样品RNA抽提 2、RNA质检 3、RNA逆转录cDNA 4、cirRNA特殊引物设计及其调试 5、cirRNAPCR扩增 6、PCR数据统计 |
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2016-08-24 14:02:23, 373.62 K
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