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蛋白质富集-求一种钙离子的螯合剂,生成水溶性螯合物,在280 nm没吸收? 已有1人参与
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现在在做一蛋白的富集实验,用含钙离子的Buffer使其与液相色谱柱相结合,然后用另一含有EDTA的Buffer与钙离子螯合,使得蛋白从柱子上被释放掉。 但是EDTA与钙离子结合后,形成的螯合物在280 nm有明显的紫外吸收,谱图会在原来的基础上明显上升,进样后蛋白也在死时间被洗下来,蛋白的峰和螯合物的峰重叠,非常讨厌。现求一种钙离子的螯合剂,生成水溶性螯合物(不能是沉淀,堵柱子),在280 nm没吸收? 还有EDTA适合用于液相吗?对泵会不会有伤害呢? |
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2楼2016-08-20 12:55:45
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现在切换B后,B中的EDTA与柱子中的钙离子螯合形成的螯合物在死时间出峰,因为钙离子被螯合掉,此时结合在柱子上的蛋白质被释放,此时蛋白质也出来了,峰有重叠,这样就不能去定量了。 @klicking 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-08-20 20:03:56
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