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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 多糖的单糖组成分析
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烟雨斜飞

新虫 (小有名气)

[求助] 多糖的单糖组成分析

在多糖的单糖成分分析中，利用高效液相色谱法分析单糖种类及比例。其中将各单糖标准品混合后，进行HPLC分析。请问：
       （1）出峰时间有先后，怎样判断哪一时间出现的峰对应是哪一种标准单糖？
       （2）分析出多糖中所含的单糖种类后，怎样计算各单糖的比例？
        新手，请各位大侠不吝赐教啊！！感谢各位大侠！
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把握时间，做有意义的事情，加油！！
1楼2016-08-10 18:50:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cgjlove

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
烟雨斜飞: 金币+4, ★★★很有帮助 2016-08-11 18:09:07
引用回帖:
3楼: Originally posted by 烟雨斜飞 at 2016-08-10 22:05:24
还想请问一下您：
（1）如果一个一个进样的话，怎样才能做出下面这样的图呢（截取文献里面的一张图）？
（2）计算单糖比例的时候，可以直接利用软件进行封面街计算么？不做标准曲线。
多谢了！！

R7`)PL4970K7 ...

（1）下面的是混标的图，一个一个进样只能得到一个个单峰，你把标品混在一起就能跑出那个图了
（2）不做标曲肯定不行，相同浓度的不同种单糖相应的峰面积不一样的。所以标曲是肯定要的。
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4楼2016-08-10 22:37:31
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cgjlove

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
烟雨斜飞: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2016-08-10 22:06:00
shenyingbin: 金币+2, 谢谢精彩回答，请多回帖。 2016-08-15 17:07:58
（1）如果实验室没有做过那你可以单糖标品一个一个进样根据出峰时间就可以判定了，要是实验室做过根据出峰时间次序就能知道是哪种单糖。
（2）做不同浓度单糖标曲，可以根据峰面积算出来的
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2楼2016-08-10 19:12:54
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
烟雨斜飞: 金币+4, ★★★很有帮助 2016-08-11 18:09:43
烟雨斜飞: 金币+4, ★★★很有帮助 2016-08-11 18:10:12
shenyingbin: 金币+2, 谢谢精彩回帖。 2016-08-15 17:08:41
最准确的就是先一个一个进样，确定各单糖的出峰的时间，也可以参考文献，一般实验条件相同单糖的出峰顺序也一样，然后进混标，做标准曲线，根据各单糖的浓度与峰面积的关系推算出计算各单糖比例。峰面积由液相自动积分获得不是更简单。
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
5楼2016-08-11 08:52:39
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ody2004

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

买每个单糖做标准曲线。
如果你要是有离子色谱，更好用。hplc对有些单糖分的不是特别好。
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6楼2016-08-11 18:10:53
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普通回帖

烟雨斜飞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cgjlove at 2016-08-10 19:12:54
（1）如果实验室没有做过那你可以单糖标品一个一个进样根据出峰时间就可以判定了，要是实验室做过根据出峰时间次序就能知道是哪种单糖。
（2）做不同浓度单糖标曲，可以根据峰面积算出来的

还想请问一下您：
（1）如果一个一个进样的话，怎样才能做出下面这样的图呢（截取文献里面的一张图）？
（2）计算单糖比例的时候，可以直接利用软件进行封面街计算么？不做标准曲线。
多谢了！！
多糖的单糖组成分析
R7`)PL4970K7VMCXRXIYEEV.png
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3楼2016-08-10 22:05:24
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烟雨斜飞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cgjlove at 2016-08-10 19:12:54
（1）如果实验室没有做过那你可以单糖标品一个一个进样根据出峰时间就可以判定了，要是实验室做过根据出峰时间次序就能知道是哪种单糖。
（2）做不同浓度单糖标曲，可以根据峰面积算出来的

嗯，资料也显示，可先根据标准曲线，由峰面积计算质量浓度。下面一张图，是我从一篇文献里面截取下来的，但是划红线的部分，看了好久也没看懂，请大侠赐教啊！
多糖的单糖组成分析-1
JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png
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7楼2016-08-11 18:12:44
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烟雨斜飞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ody2004 at 2016-08-11 18:10:53
买每个单糖做标准曲线。
如果你要是有离子色谱，更好用。hplc对有些单糖分的不是特别好。

哦哦 ，谢谢提点哈！
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8楼2016-08-11 18:14:25
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烟雨斜飞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by w911227 at 2016-08-11 08:52:39
最准确的就是先一个一个进样，确定各单糖的出峰的时间，也可以参考文献，一般实验条件相同单糖的出峰顺序也一样，然后进混标，做标准曲线，根据各单糖的浓度与峰面积的关系推算出计算各单糖比例。峰面积由液相自动积 ...

在文献里面发现下面的信息，但是没看懂划线部分，请赐教！谢了哈！
多糖的单糖组成分析-2
JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png
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9楼2016-08-11 18:17:48
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w911227

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 烟雨斜飞 at 2016-08-11 18:17:48
在文献里面发现下面的信息，但是没看懂划线部分，请赐教！谢了哈！

JA8~I`90L@T5E@%9K`JZT%4.png
...

他的意思是说做标准曲线的时候横坐标用的是标准品的质量浓度，也就是mg/mL，所以根据标准曲线计算出来的是单糖的质量比例，但是一般我们在论文中使用的时候计算的是各单糖的摩尔比例，所以需要将质量比例换算成摩尔比例
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10楼2016-08-12 08:59:46
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