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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 感受态细胞制备，菌体离心沉淀不紧
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diaomou

新虫 (小有名气)

[求助] 感受态细胞制备，菌体离心沉淀不紧 已有2人参与

用SOB培养基18度培养DH5α，哪怕4000rpm，25分钟离心，菌体沉淀都不紧，倒上清时候会把绝大部分沉淀倒掉。
已经确定与离心机无关，与用离心杯还是50毫升离心管无关。
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1楼 2016-08-09 10:59:13
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diaomou

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by swgcpy at 2016-08-11 20:22:58
同意楼上的，镜检一下是不是大肠吧

应该不是污染了。
就是SOB培养基浮力大的原因。
换成LB培养基培养，就好了。
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6楼2016-08-11 22:27:04
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-09 16:44:52
转速提高试试，之前用过8000r/min
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2楼2016-08-09 11:25:01
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diaomou

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2016-08-09 11:25:01
转速提高试试，之前用过8000r/min

5000rpm,5min也不行。
担心转速太高，影响感受态细胞活性。
估计是SOB密度高，浮力大的原因？因为之前用LB做感受态没遇到这种情况
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3楼2016-08-09 11:37:06
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌可能污染了，最好重新换靠谱的种子菌。
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4楼2016-08-11 09:12:42
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